PCR - MOLEKÜLER BİYOLOJİ
Şunları yapmak istiyorsunuz:
- Mutasyonları (nokta mutasyonları (SNP'ler), eklemeler, silmeler) tanımlamak için bir dizilim belirlemek
- Bireyler veya popülasyonlar arasındaki akrabalık ilişkilerini değerlendirmek
- Belirli bir organizmanın bir biyolojik örnekte varlığını ortaya koymak
- Rekombinant bir proteinin sentezi için bir ifade vektöründe klonlama gerçekleştirmek...
Bu analizler genellikle PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu) adı verilen enzimatik bir reaksiyonla genetik materyalin amplifikasyonunu gerektirir. Bu reaksiyon genellikle DNA'dan gerçekleştirilir. Bazı özel uygulamalar için, başlangıç materyali olarak RNA'nın ters transkripsiyonu ile elde edilen cDNA kullanılır.
Yöntemin Prensibi
DNA molekülleri, doğal hallerinde, iki tamamlayıcı iplikçikten oluşur. 94 °C'nin üzerindeki bir sıcaklığa geçiş, DNA'nın iki iplikçiklerinin ayrılmasına ve ikincil yapıların yok olmasına neden olur (denatürasyon aşaması).